AFFINITY PURIFICATION · HIS TAG
RedConju Ni-NTA 琼脂糖磁珠
NTA 配基螯合 Ni²⁺,用于快速捕获 6×His 标签蛋白,适合小规模、平行化和条件筛选型纯化。
仅供科研使用(RUO) · 说明书已核对接入RedConjuNi-NTA 琼脂糖磁珠HIS PURIFICATION1–5 µm · 40% (v/v)
NTA-chelated Ni²⁺
磁性基质磁性琼脂糖微球magnetic separation
粒径1–5 µmagarose beads
产品形式40% (v/v)volume / volume
说明书已接入V1.0 · 2026-08-11
01 / OVERVIEW
产品信息
参数来自本次上传的正式产品说明书;网页未把同类产品参数混用。产品名称RedConju Ni-NTA 琼脂糖磁珠
英文名称RedConju Ni-NTA Magnetic Agarose Beads
货号 / 规格1 mL:HXL-NTA-mag-agro-1;4 mL:HXL-NTA-mag-agro-4;20 mL:HXL-NTA-mag-agro-20
基质磁性琼脂糖微球
配基NTA-chelated Ni²⁺
粒径1–5 µm
产品形式40% (v/v) slurry
结合容量>40 mg 6×His-tagged protein / mL beads
适用样本原核 / 真核表达裂解液、培养上清或预纯化样品;优先使用澄清样品
主要应用His 标签蛋白纯化、表达筛选、pull-down 前处理与自动化条件开发
标准起点160 µL slurry + 0.5–1.0 mL 澄清裂解液
推荐洗脱250–300 mM imidazole,pH 8.0;50–100 µL,5–10 min
保存条件20% 乙醇、1× PBS;2–8 °C;禁止冷冻或干燥
用途仅供科研使用(RUO),不用于临床诊断或治疗
02 / PRINCIPLE
从特异结合到磁性洗脱
03 / PROTOCOL
天然条件 His 标签蛋白纯化
以下为说明书的天然条件标准流程;变性纯化需保持尿素或盐酸胍贯穿全流程。样本准备
不含 EDTA / EGTA 的条件下裂解;4 °C 高速离心获得澄清上清。
平衡
取 160 µL slurry,用 500 µL 结合缓冲液平衡 2 次。
结合
加入 0.5–1.0 mL 样品,室温 30 min;温敏蛋白可 2–8 °C 45–60 min。
收集 FT
磁分离至上清澄清,保留 Flow-through。
洗涤
500–1,000 µL、20–40 mM imidazole 洗涤液,共洗 3 次。
洗脱
50–100 µL、250–300 mM imidazole,室温 5–10 min;可二次洗脱。
关键点
EDTA / EGTA 会剥离金属离子;高浓度咪唑可能影响蛋白定量、酶活或后续偶联,必要时脱盐或换液。
04 / VALIDATION
不要只看最终洗脱液
分别分析 Input、Flow-through、Wash 1 / 3 与 Elution 1 / 2;不要用固定复用次数替代性能趋势判断。INPUT起始样本
→FLOW-THROUGH判断过载
→WASH判断损失
→ELUTION纯度与回收
— DOCUMENTS
产品说明书
文件已按产品逐一接入。实验前仍应核对瓶签、批次 COA 与本页显示的货号。
需要优化结合与洗脱条件?