IMMUNOPRECIPITATION · FLAG TAG
Anti-DYKDDDDK(Anti-FLAG)琼脂糖磁珠
以固定化 Anti-FLAG 抗体捕获 FLAG 标签蛋白或蛋白复合物,并可用 3×FLAG peptide 在近中性条件下竞争洗脱。
仅供科研使用(RUO) · 说明书已核对接入RedConjuAnti-FLAG 琼脂糖磁珠IP / CO-IP1–5 µm · 40% (v/v)
Immobilized Anti-DYKDDDDK antibody
磁性基质磁性琼脂糖magnetic separation
粒径1–5 µmagarose beads
产品形式40% (v/v)volume / volume
说明书已接入V1.0
01 / OVERVIEW
产品信息
参数来自本次上传的正式产品说明书;网页未把同类产品参数混用。产品名称Anti-DYKDDDDK(Anti-FLAG)琼脂糖磁珠
英文名称Anti-DYKDDDDK (Anti-FLAG) Magnetic Agarose Beads
货号 / 规格1 mL:HXL-FLAG-mag-agro-1;4 mL:HXL-FLAG-mag-agro-4;20 mL:HXL-FLAG-mag-agro-20
基质磁性琼脂糖
配基Immobilized Anti-DYKDDDDK antibody
粒径1–5 µm
产品形式40% (v/v) slurry
结合容量>1 mg FLAG-tagged protein / mL settled beads
适用样本0.20–1.00 mL 澄清裂解液;常用起点 0.50 mL
主要应用FLAG 标签蛋白 IP、Co-IP 与小规模亲和纯化
标准起点50 µL slurry / 反应,约含 20 µL settled beads
推荐洗脱0.30 mg/mL 3×FLAG peptide,50 µL,室温混匀 30 min
保存条件2–8 °C;禁止冻结
用途仅供科研使用(RUO),不用于临床诊断或治疗
02 / PRINCIPLE
从特异结合到磁性洗脱
03 / PROTOCOL
FLAG 标签蛋白标准捕获流程
以 50 µL 磁珠悬液 / 反应为说明书标准起点。样本澄清
4 °C、12,000–16,000 × g 离心 10 min,并保留 Input。
预洗
50 µL slurry 用 500 µL 结合 / 洗涤液预洗 2 次。
结合
加入 0.20–1.00 mL 样品,4 °C 温和混匀 2–4 h。
收集 FT
磁分离后保留 Flow-through,判断是否过载。
洗涤
每次 500 µL,共洗 4 次;高背景时再优化盐和去污剂。
肽洗脱
加入 50 µL、0.30 mg/mL 3×FLAG peptide,室温 30 min;可二次洗脱。
关键点
说明书流程摘要里曾出现 0.20 mg/mL,但详细配方和步骤均为 0.30 mg/mL;网页按详细步骤呈现,实验前仍应核对当前批次文件。
04 / VALIDATION
不要只看最终洗脱液
建议按相同比例上样 Input、FT、末次 Wash、E1 与 E2,并评估游离肽对定量和质谱的影响。INPUT起始样本
→FLOW-THROUGH判断过载
→WASH判断损失
→ELUTION纯度与回收
— DOCUMENTS
产品说明书
文件已按产品逐一接入。实验前仍应核对瓶签、批次 COA 与本页显示的货号。
需要优化结合与洗脱条件?